Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology / Avaliação de três vacinas de Aeromonas hydrophila precipitadas com alúmen administradas a Labeo rohita, Cirrhinus mrigala e Ctenopharyngodon idella: imunocinética, desafio de imersão e histopatologia

Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was [...].

Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes [...].

Comparative Study of the Genetic Diversity, Antimicrobial Resistance, and Pathogenicity of / 生物医学与环境科学（英文）

Objective@#This study was performed to compare the genetic diversity, virulence, and antimicrobial resistance of @*Methods@#A total of 38 clinical strains and 19 strains from healthy individuals were isolated from the samples collected in Ma'anshan City, Anhui Province. Their taxonomy was investigated using concatenated @*Results@#The 57 @*Conclusions@#The taxonomy, virulence properties, and antibiotic resistance of

Elevada frequência de Aeromonas spp. e genes de virulência em cultivos de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) em tanques-rede, na região semiárida de Pernambuco, Brasil / High frequency of Aeromonas spp. and virulence genes in Nile Tilapia farms (Oreochromis niloticus) in semi-arid regions of Pernambuco, Brazil

Objetivou-se avaliar a ocorrência de Aeromonas spp. em peixes e amostras de água na região semiárida de Pernambuco e avaliar a frequência de aerolissina (aerA), enterotoxina citotóxica (act), enterotoxina citotônica (alt) e serina protease (ahp) nesses isolados. Foram analisados 70 peixes vivos e oito mortos com sinais clínicos de aeromoniose e 16 amostras de água. Aeromonas spp. foram identificadas por análises microbiológicas (provas bioquímicas) e molecular, usando-se primers específicos para a região 16S rRNA, e a distribuição dos quatro fatores de virulência (aerA, alt, act e ahp) foi investigada por ensaio de PCR. Cento e cinquenta e cinco (84,7%) isolados foram confirmados como Aeromonas spp. na análise molecular. Os genes de virulência mais frequentes foram act (53,55%) e aerA (51,61%). De acordo com o tipo de amostra, observou-se maior frequência do gene aerA (87,5% P=0,0474) em isolados de peixes mortos e a menor frequência do gene act (47,73% P=0,0002) em peixes vivos. Este estudo demonstrou a presença de aeromoniose no cultivo de tilápias em tanques-rede, nos municípios de Jatobá e Petrolândia, na região semiárida de Pernambuco. A detecção de aerA, act e alt pode ser utilizada na tipagem de virulência de Aeromonas spp.(AU)

The purpose of this study was to evaluate the occurrence of Aeromonas spp. from fishes and tilapia net-cage farm water in semi-arid regions of Pernambuco and to evaluate the frequency of the aerolysin (aerA), cytotoxic enterotoxin (act), cytotonic enterotoxin (alt) and serine protease (ahp) genes in Aeromonas isolates. 70 live and eight dead fish with aeromoniosis clinical signs and 16 water samples were analyzed. Aeromonas spp. isolated were identified by microbiological (biochemical evidence) and molecular analysis using specific primers for 16SrRNA region, while the distribution of four virulence factors, including aerA, alt, act and ahp, was investigated by PCR assay. One hundred fifty-five (84.7%) isolates were confirmed as Aeromonas spp. by molecular analysis. The most frequent virulence genes in isolates were act (53.55%) and aerA (51,61%). According to the kind of sample, the higher frequency of aerA gene (87.5% P= 0.0474) was observed in isolates from dead fish and the lowest frequency of act gene (47.73% P= 0.0002) from live fish. This study found the presence of aeromoniosis on tilapia farming in net-cages on Jatobá and Petrolândia counties in the semiarid Pernambuco region. The detection of aerA, act and alt can be used for virulence typing of Aeromonas spp. isolates.(AU)

Genes de virulencia en Aeromonas spp. (Aeromonadales: Aeromonadaceae) aisladas de Oreochromis spp. (Perciformes: Cichlidae) para consumo humano en México / Virulence genes in Aeromonas spp. (Aeromonadales: Aeromonadaceae) isolated from Oreochromis spp. (Perciformes: Cichlidae) destined for human consumption in Mexico

Resumen Las especies del género Aeromonas se encuentran ampliamente distribuidas en ecosistemas acuáticos, son bacilos Gram negativas, oxidasa positivas y fermentadoras de glucosa que han sido consideradas patógenas emergentes en humanos. Por otra parte, Aeromonas pertenece a la microbiota normal de los peces, no obstante, estos microorganismos poseen una diversidad de factores de virulencia responsables de una variedad de infecciones en humanos, principalmente de tipo gastrointestinal. La presencia de Aeromonas en productos destinados a consumo de alta demanda comercial como la tilapia genera preocupación sanitaria por el potencial patogénico que posee esta bacteria. En este contexto, identificar genes de virulencia presentes en cepas de Aeromonas aisladas en Oreochromis spp. para consumo humano en Reynosa, Tamaulipas, México; es de importancia ante la escasez de estudios moleculares al respecto en la zona. En el presente estudio se analizó el potencial patogénico de 15 cepas de Aeromonas previamente identificadas molecularmente mediante PCR y secuenciación, procedentes de Oreochromis spp. Mediante PCR se analizaron seis genes de virulencia (alt, ast, aerA, hlyA, gcat y stx1) y las cepas utilizadas como control fueron: Aeromonas hydrophila subsp. hydrophila ATCC 7966, Aeromonas caviae 429865 INP, Escherichia coli O157:H7 y Escherichia coli K12. El 100 % (n = 15) de las cepas presentaron al menos un gen de virulencia, el gen aerA se detectó en 86.66 % de las cepas analizadas, mientras que los genes ast y stx1 no fueron identificados. Se encontró que las cepas de Aeromonas presentaban genes asociados en una misma cepa: aerA/gcat, alt/aerA, alt/ aerA/gcat/hlyA y alt/aerA/gcat, de los cuales aerA/gcat se observó con mayor frecuencia y principalmente en A. veronii, mientras que, A. hydrophila presentó el mayor número de asociaciones de genes de virulencia. Estos hallazgos indican que las cepas de Aeromonas aisladas en Oreochromis spp. tienen el potencial de causar enfermedades en humanos. Por lo tanto, es necesario proporcionar información sobre esta bacteria emergente, para tratar y controlar eficazmente cualquier posible evento epidemiológico causado por la misma.(AU)

Abstract The genus Aeromonas are widely distributed in aquatic ecosystems are Gram-negative rods, oxidase-positive, and glucose-fermenting, considered emerging pathogens in humans. Aeromonas belongs to the fish microbiota, these microorganisms have a diversity of virulence factors responsible for a variety of infections in humans mainly gastrointestinal diseases. The presence of Aeromonas in products intended for consumption with high commercial demand such as tilapia generates sanitary concern due to the pathogenic potential of this bacteria. In this context, identification of virulence genes in strains of Aeromonas isolated in Oreochromis spp. intended for human consumption in Reynosa, Tamaulipas, Mexico is important due to the lack of molecular studies in this geographical area. In the present study the pathogenic potential of 15 strains of Aeromonas (A. veronii, A. hydrophila and A. schubertii) from Oreochromis spp. for human consumption were analyzed. Through PCR six virulence genes were analyzed (alt, ast, aerA, hlyA, gcat and stx1) and the strains used as control were: Aeromonas hydrophila subsp. hydrophila ATCC 7966, Aeromonas caviae 429865 INP, Escherichia coli O157: H7 and Escherichia coli K12. El 100 % (n = 15) of the strains harbored at least one virulence gene, aerA gene was detected in 86.66 % of the analyzed strains, while ast and stx1 genes were not identified. Moreover, Aeromonas strains had associated genes in the same strain: aerA / gcat, alt / aerA, alt / aerA / gcat / hlyA and alt / aerA / gcat, of which aerA / gcat were observed mostly in A. veronii, while A. hydrophila had the highest associations. These findings indicate that the strains of Aeromonas isolated in Oreochromis spp. have the potential to cause human diseases, and therefore, this species used as food, could be a vehicle for infections caused by Aeromonas. It also allows to provide information on this emerging microorganism to effectively treat and control any epidemiological event caused by Aeromonas spp. in the future.(AU)

Recuperación y diferenciación de aeromonas con CromoCen AE y CromoCen AGN / Recovery and differentiation of Aeromonas with CromoCen AE and CromoCen AGN

INTRODUCCIÓN: en la actualidad las especies del género Aeromonas han emergido como un problema de salud pública, son ellas los agentes etiológicos de las enfermedades diarreicas con el aumento de la atención médica por años. Los procedimientos convencionales para su diagnóstico son muy engorrosos, laboriosos y duraderos. Una nueva metodología que emplea medios de cultivo cromogénicos ha permitido la simplificación y aceleración de su diagnóstico, que ofrece resultados altamente específicos. OBJETIVO: estudiar el efecto de la combinación de diferentes agentes selectivos de los microorganismos grampositivos sobre el aumento de la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. MÉTODOS: se estudió el efecto inhibidor de la combinación de agentes selectivos (desoxicolato de sodio (0,05-0,2 g·L-1), sales biliares (0,65 g·L-1), verde brillante (0,025-0,03 g·L-1), cristal violeta (0,001-0,01 g·L-1) y sulfito de sodio (0,8 g·L-1) sobre los microorganismos grampositivos, así como la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. Como base se utilizó la formulación de CromoCen AGN, sin el desoxicolato de sodio. RESULTADOS: los valores de las productividades de los medios CromoCen AE y CromoCen AGN a partir del inóculo 1,5 × 102 UFC·mL-1 resultaron, para: A. hydrophila 116,8 % y 23,9 %, A. caviae 100,8 % y 3,95 %, A. bestiarium 93,6 % y 28,8 %, A. culicicola 85,1 % y 66,12 %, A. veronii 116,7 % y 59,2 %, A. popoffi 86,56 % y 13,2 %, A. trota 94,8 % y 11,25 % y para A. eucrinophila 103,9 % y 2,80 %. La nueva composición cromogénica logró la diferenciación de los microorganismos por sus características culturales: color, forma, superficie, bordes en las colonias y proteólisis del medio circundante. CONCLUSIONES: la combinación de diferentes agentes selectivos para la inhibición de los microorganismos grampositivos coadyuvo el aumento de la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas.

INTRODUCTION: Species of the genus Aeromonas are a current public health problem, for they are the etiological agents responsible for the growing incidence of diarrheal diseases requiring medical care. Conventional procedures for their diagnosis are very complicated, laborious and time-consuming. A new methodology based on the use of chromogenic culture media allows diagnostic simplification and acceleration, yielding highly specific results. OBJECTIVE: Study the effect of combining several selective agents for gram-positive microorganisms upon an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. METHODS: Assessment was conducted of the inhibiting effect of combined selective agents (sodium deoxycholate (0.05-0.2 g·L-1), bile salts (0.65 g·L-1), brilliant green (0.025-0.03 g·L-1), crystal violet (0.001-0.01 g·L-1) and sodium sulfite (0.8 g·L-1)) on gram-positive microorganisms, as well as their capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. The base used was the CromoGen AGN formulation without sodium deoxycholate. RESULTS: Productivity values for the media CromoCen AE and CromoCen AGN based on inoculation of 1.5 × 102 CFU·mL-1 were 116.8 % and 23.9 % for A. hydrophila, 100.8 % and 3.95 % for A. caviae, 93.6 % and 28.8 % for A. bestiarium, 85.1 % and 66.12 % for A. culicicola, 116.7 % and 59.2 % for A. veronii, 86.56 % and 13.2 % for A. popoffi, 94.8 % and 11.25 % for A. trota, and 103.9 % and 2.8 0% for A. eucrinophila. The new chromogenic composition enabled differentiation of microorganisms based on their cultural characteristics: color, shape, surface, colony borders and environmental proteolysis. CONCLUSIONS: Combination of various selective agents for the inhibition of grampositive microorganisms led to an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species.

Ocorrência de Aeromonas spp. em alimentos de origem animal e sua importância em saúde pública / Occurence of Aeromonas spp. in foods of animal origin and its importance in public health

Aeromonas spp. são bactérias Gram negativas, oportunistas, de natureza ubíqua, isoladas principalmente de amostras de água. Até o presente momento foram reconhecidas 31 espécies, sendo as de maior importância médica Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae e Aeromonas veronii. A patogenicidade do gênero é considerada multifatorial, sendo este produtor de diversos tipos de toxinas e com envolvimento de outros fatores capazes de facilitar a penetração e o estabelecimento do agente no hospedeiro, causando doença. O objetivo desta revisão é elucidar o papel dos alimentos de origem animal como fontes de contaminação de bactérias do gênero Aeromonas para o ser humano. Isolamentos de aeromonas de diversos produtos de origem animal têm sido relatados, como carne, leite e seus derivados, além de frutos do mar, e em ambientes de processamento, como abatedouros, frigorífcos e laticínios. Tem-se buscado determinar fontes de contaminação dos alimentos, e a água foi definida como o principal disseminador. Aeromonas já foi definida como sendo a causadora de diversas enfermidades, desde afecções gastrointestinais até casos de meningite e morte. Considerando os alimentos de origem animal como importantes veículos de transmissão para o ser humano e o reconhecimento da água como fonte de disseminação do agente, torna-se imprescindível o tratamento adequado da água utilizada nos estabelecimentos processadores de alimentos para a segurança alimentar.(AU)

Aeromonas spp. are opportunistic, ubiquitous Gram negative bacteria, mostly isolated from water samples. Until the present time, 31 species have been recognized, and the most medically important are Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae and Aeromonas veronii. The pathogenicity of the genus is considered to be multifactorial, and it can produce several types of toxins, with the involvement of other factors that facilitate the penetration and the establishment of the agent in the host, thus causing the disease. Te objective of this review is to elucidate the role of foods of animal origin as sources of contamination of aeromonas to humans. Aeromonas have been reported in various animal products such as meat, milk, dairy products, and seafood, and also in processing environments such as slaughterhouses, meat and dairy plants. There has been the attempt to determine sources of food contamination, being the water defined as the main disseminator. Aeromonas has been defined as the cause of many diseases, from gastrointestinal affections to cases of meningitis and even death. Considering that animal foods are an important source of contamination for humans and because of the recognition of water as a source of dissemination, it is essential for food security to provide the proper treatment of water used in food processing establishments.(AU)

Molecular characterization of Aeromonas spp. and Vibrio cholerae O1 isolated during a diarrhea outbreak / Caracterização molecular de Aeromonas spp. e Vibrio cholerae O1 isolados durante um surto de diarréia

This work aimed to assess pathogenic potential and clonal relatedness of Aeromonas sp. and Vibrio cholerae isolates recovered during a diarrhea outbreak in Brazil. Clinical and environmental isolates were investigated for the presence of known pathogenic genes and clonal relatedness was assessed by intergenic spacer region (ISR) 16S-23S amplification. Four Aeromonas genes (lip, exu, gcat, flaA/B) were found at high overall frequency in both clinical and environmental isolates although the lip gene was specifically absent from selected species. A fifth gene, aerA, was rarely found in A. caviae, the most abundant species. The ISR profile revealed high heterogeneity among the Aeromonas isolates and no correlation with species identification. In contrast, in all the V. cholerae isolates the four genes investigated (ctxA, tcpA, zot and ace) were amplified and revealed homogeneous ISR and RAPD profiles. Although Aeromonas isolates were the major enteric pathogen recovered, their ISR profiles are not compatible with a unique cause for the diarrhea events, while the clonal relationship clearly implicates V. cholerae in those cases from which it was isolated. These results reinforce the need for a better definition of the role of aeromonads in diarrhea and whether they benefit from co-infection with V. cholerae.

O objetivo deste trabalho foi estabelecer o potencial patogênico e a relação clonal de isolados de Aeromonas sp. e Vibrio cholerae obtidos durante um surto de diarréia. Isolados clínicos e ambientais foram investigados quanto à presença de genes de virulência e sua relação clonal foi obtida através de amplificação da Região Espaçadora Intergênica (REI) 16S-23S. Quatro genes de Aeromonas (lip, exu, gcat, flaA/B) foram encontrados em alta frequência embora o gene lip tenha se mostrado ausente em algumas espécies. Um quinto gene, aerA, foi raramente encontrado em A. caviae, a espécie mais abundante. O perfil da REI revelou alta heterogeneidade entre os isolados de Aeromonas e nenhuma correlação com espécie. Em contraste, todas as amostras de V. cholerae amplificaram os genes investigados (ctxA, tcpA, zot e ace) e revelaram perfil clonal através de REI e RAPD. Embora Aeromonas tenha sido o principal patógeno isolado, o perfil da REI não é compatível como única causa para os eventos de diarréia, enquanto a relação clonal de V. cholerae aponta esse microrganismo como o provável agente do surto. Estes resultados reforçam a necessidade de definir melhor o papel de Aeromonas em diarréias e de que forma essas bactérias se beneficiam quando em co-infecção com V. cholerae.

Markers of pathogenicity islands in strains of Aeromonas species of clinical and environmental origin.

The aim of this study was to investigate the presence of markers of pathogenicity islands that may be informative to detect the virulent PAI carriers of clinical and environmental strains of Aeromonas spp. isolated in Mexico. virB2, virB9 and virB11 genes were found in Aeromonas strains isolated from environmental and clinical sources while cagE and tfc16 genes were only in strains of environmental origin. Having performed the wide screening presented in this study, we now have a set of strains to map and confirm the presence of a pathogenicity island in Aeromonas strains isolated in Mexico.

Characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. veronii associated with ulcerative syndrome from Chinese longsnout catfish (Leiocassis longirostris Günther)

273 bacterial strains were isolated from 20 Chinese longsnout catfish samples. The biochemical characteristics of all strains conformed to the species description of Aeromonas veronii bv. veronii on the basis of Vitek GNI+ card. Furthermore, 16S rDNA, gyrB and rpoD sequences of the representative strain PY50 were sequenced and showed high similarity with A. veronii bv. veronii in Genbank. Antibiotic-resistance of the representative strain PY50 was assessed by the Kirby-Bauer disk diffusion method, and the results showed it was susceptible and moderately susceptible to 13 and 4 of the 21 antimicrobial agents tested. Extracellular products of strain PY50 contained gelatinase, lecithinase, elastase, most of lipase and lipopolysaccharide. Virulence of strain PY50 and extracellular products to Chinese longsnout catfish were also tested, and LD50 were about 3.47~10(4) CFU per fish and 11.22 ƒÊg per fish in intraperitoneal injection respectively. This is the first report that A. veronii bv. veronii was the pathogenic agent of ulcerative syndrome in Chinese longsnout catfish.

Caracterización fenotípica y factores de virulencia en cepas de Aeromonas aisladas de pacientes con enfermedad diarreica aguda en Cuba / Phenotypic characteristics and virulence factors in Aeromonas strains isolated from patients with diarrheic disease in Cuba

Fifty four strains of Aeromonas spp were isolated from patients with acute diarrheic episodes by using Aerokey II and Aeroesquema methods. In vitro antimicrobial susceptibility and virulence factors were analyzed. The most frequently isolated specie was Aeromonas caviae. Over 75 percent of strains exhibited resistance to penicillins and ce-phalosporins; for the other antibiotic groups resistance was under 20 percent. Twenty six strains (48.1 percent) were multiresist-ant. At least one virulence factor among those evaluated in the study was present in 53 (98.1 percent) of the 54 strains.

Se identificaron 54 cepas de Aeromonas aisladas de pacientes con enfermedad diarreica aguda mediante los métodos Aerokey II y Aeroesquema. Se determinó la susceptibilidad antimicrobiana y algunos factores de virulencia. La especie encontrada en mayor frecuencia fue Aeromonas caviae. Se observaron valores de resistencia por sobre 75 por ciento para penicilinas y cefalotina; para el resto de los antimicrobianos estos valores se encontraron bajo 20 por ciento>; 26 cepas (48,1 por ciento) presentaron multi-resistencia. Al menos un factor de virulencia de los investigados estuvo presente en 53 (98,1 por ciento) de las 54 cepas analizadas.

Pesquisa de Aeromonas ssp., Vibrio ssp. e da qualidade sanitária de peixes comercializados na cidade de São Paulo / Investigation of Aeromonas and Vibrio species and sanitary quality in fish commercialized in São Paulo City

Práticas nutricionais saudáveis e a globalização cultural popularizaram o consumo de pratos à base de peixe cru, anteriormente restritos aos países orientais. Estimativas mostram que as doenças de origem alimentar causam aproximadamente 76 milhões de casos, 325 mil hospitalizações e 5 mil mortes a cada ano, somente nos Estados Unidos. Casos com etiologia desconhecida somam 62 milhões, com 265 mil hospitalizações e 3.200 mortes. O objetivo deste estudo foi investigar a presença de Escherichia coli, Salmonella spp. e Staphylococcus aureus e cepas potencialmente patogênicas de Aeromonas spp. e Vibrio spp. em peixes comercializados em feiras livres da cidade de São Paulo, Brasil. Vinte amostras de peixes, de diferentes espécies, foram adquiridas em feiras livres e analisadas utilizando metodologia convencional para investigação de patógenos em alimentos. Altos níveis de contaminação fecal foram detectados em 25 por cento das amostras. Staphylococcus aureus foi isolado em 10 por cento das amostras, entretanto em valores abaixo do permitido pela legislação brasileira. Todas as amostras estavam negativas para salmonella spp. V. parahaemolyticus não foi isolada, 30 por cento das amostras foram positivas para outras espécies de Vibrio, inclusive Vibrio cholerae não-O1/não-O139. Aeromonas spp., incluindo A. hydrophilia foi isolada em 50 por cento das amostras de peixe. O isolamento de Vibrio cholerae não-O1/não-O139 e Aeromonas hydrophilia, assim como Staphylococcus aureus e Escherichia coli, sugere que peixes comercializados em feiras livres de São Paulo podem representar um risco para os consumidores e ser um importante veículo de transmissão de espécies enteropatogênicas.

Diversidade e perfil plasmidial de bactérias do gênero Aeromonas isoladas de ambientes aquáticos do Estado de São Paulo / Diversity and plasmidial profile of bactéria of the genus Aeromonas isolated from aquatic evironments os State of São Paulo

Introdução: O gênero Aeromonas é ubiqüitário no ambiente aquático e já foi isolado de água doce, salgada, salobra, mineral, poluída ou tratada. Várias espécies de Aeromonas apresentam fatores de virulência e podem estar relacionadas a uma série de doenças para seu hospedeiro. Objetivo: Estudar a diversidade e caracterizar molecularmente através do perfil plasmidial, as diferentes espécies do gênero Aeromonas provenientes de corpos hídricos de São Paulo. Métodos: Foram coletadas 19 amostras de água, sendo 11 amostras de água doce, 1 de água salobra,e 7 de água salgada. As amostras foram concentradas através de membrana filtrante e enriquecidas em 100mL de água peptonada alcalina 1por cento. As amostras foram estriadas em placas de petri contendo diferentes meios de cultivo. As colônias típicas foram submetidas a provas bioquímicas para a identificação das espécies. Foi feito o levantamento bibliográfico do Índice de qualidade de Água (IQA) na CETESB, dos pontos de coleta analisados. Para análise do perfil plasmidial, foi utilizada a metodologia descrita por BIRNBORN e DOLU (1979). Resultados: As espécies de Aeromonas foram isoladas em 84,2por cento dos ambientes isolados; segundo os dados do CETESB, 58,3por cento das amostras apresentaram condições favoráveis de qualidade de água; 43,2por cento das cepas isoladas apresentaram pelo menos um plasmídio. Conclusões: Concluiu-se que esses organismos estão amplamente distribuídos no ambiente aquático e que as espécies de Aeromonas não apresentam o mesmo perfil plasmidial, Os organismos isolados dos ambientes estudados podem representar risco à saúde.

Avaliação da qualidade sanitária e ocorrência de Aeromonas spp em lagoas de pesque-pague da região metropolitana de São Paulo / The evaluation of sanitary conditions and the ocurrence of the genus Aeromonas in fee-fishing ponds located in the São Paulo metropolitan region, Brazil

Introdução. As atividades de pesca esportiva, denominadas lagoas de pesque-pague, têm sido utilizadas como alternativa de lazer pela maioria das pessoas que vivem nos grandes centro urbanos. Entretanto, as condições sanitárias das águas desses estabelecimentos é uma importante questão na manutenção da saúde dos consumidores. Objetivo. Avaliar as condições sanitárias da água e a ocorrência do gênero Aeromonas em lagoas de pesque-pague localizadas na Região Metropolitana de São Paulo. Métodos. Amostras de 30 lagoas de pesca foram obtidas durante as estações seca (inverno) e chuvosa (verão), para contagem de coliformes fecais e ocorrência de bactérias patogênicas tais como Salmonella spp acima dos valores recomendados pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA N°20-01/06/86) durante a estação seca e cerca de 33,3 por cento na chuvosa. O gênero Aeromonas foi observada em alta freqüência (>80 por cento) nas lagoas de pesca, durante os períodos seco e chuvoso. Em adição, uma alta diversidade de espécies de Aeromonas foi observada também nas amostras de água (61 por cento) e peixe (55,5 por cento) Conclusões. Os elevados níveis de matéria orgânica nos reservatórios observados durante a estação chuvosa contribuíram para os reservatórios observados durante a estação chuvosa contribuíram para os níveis de coliformes fecais e Aeromonasspp, além disso, a prática de manejo inadequada contribuiu para a manutenção de um qualidade da água insatisfatória. Em adição, cepas de Aeromonas spp detectadas nas amostras de água e peixe, durante ambos os períodos, apresentaram uma elevada porcentagem de plasmídios, sugerindo a ocorrência de fatores de resistência neste grupo de bactérias patogências.

Biochemical characterization of the aeromonas species isolated from food and environment

Very few studies have been carried out to comprehensively characterize Aeromonas isolates. This study reports biochemical and enzymatic characterization of 60 isolates belonging to seven Aeromonas species. Seven types of API [Analytab Production Incorporation, France] strips [API 20 E, API 20 NE, Rapid ID 32 E, API 50 CH, ID 32 GN, ID 32 C, Rapid ID 32 A] were used for the biochemical characterization of the isolates. These strips provided an extensive biochemical profile of the isolates. AI 20 E gave reliable results. The H [2] S tubule of this strip was added with gelatin-cysteine-thiosulfate medium and got excellent results for H [2] S production from cysteine. Esculin formulation in ID 32 C was proved most reliable as no false positive or as many false positive and false negative results were given by it. All other strips provided test profile and some of the characteristics in them appeared as significant in differentiation of the various species

Cytotoxin testing of environmental Aeromonas spp. in Vero cell culture.

BACKGROUND & OBJECTIVES: Aeromonas spp. are known to cause a variety of infections in humans and this organism has been isolated from a variety of sources including environmental sources. The pathogenicity of the environmental isolates in and around Vellore has not been studied. This study was conducted to determine the cytotoxicity of the Aeromonas spp. isolated from water bodies, soil sediments, plankton and sewers in and around Vellore. METHODS: Aeromonas spp. isolated from environmental sources were identified by standard procedures. Representative isolates of Aeromonas spp. were tested for cell free cytotoxic factor in tissue culture system. Undiluted and diluted cell free filtrates of isolates and known toxigenic and non-toxigenic bacteria were added to Vero cell monolayer in microtitre plates. After appropriate incubation in 5 per cent CO2 atmosphere, the microtitre plate was examined for cytopathic effect. Cell detachment and shrinkage of Vero cells were recorded as toxic changes. RESULTS: All 36 environmental isolates demonstrated cytopathic effect of which 41.7, 50 and 8.3 per cent belonged to A. hydrophila, A. veronii biotype sobria and A. caviae respectively. INTERPRETATION & CONCLUSION: The results demonstrated the presence of potentially pathogenic environmental aeromonads in and around Vellore and they produced cytotoxin.

Estudo da ocorrência do gênero Aeromonas em sistemas de tratamento de esgotos por lagoas de estabilização no Município de Lins - SP / The ocurrence of the genus Aeromonas in watewater treatment systems by stabilization ponds in the City of Lins, SP

Introdução: Organismos pertencentes ao gênero Aeromonas estão amplamente distribuídos no ambiente aquático sendo atualmente considerados como patógenos emergentes. Estudos demonstraram que, estes podem produzir uma série de fatores de virulência, e ainda um maior número de casos clínicos vêm sendo confirmados e atribuídos às diferentes espécies de Aeromonas. Objetivo: Estudar a ocorrência do gênero Aeromonas em efluentes de um sistema de lagoas de estabilização e discutir o significado da presença destes para a saúde pública. Métodos: A determinação de Aeromonas spp foi realizada pela técnica de tubos múltiplos (NMP/100 mL). Para a verificação da presença e ausência (PA) as colônias foram isoladas em ágar sangue ampicilina, ágar amido ampicilina e ágar MacConkey. As colônias que apresentaram resultados presuntivos para o grupo Aeromonas foram submetidas ao reisolamento em Ágar Amido, e a provas bioquímicas para identificação das espécies. O perfil plasmidialfoi realizado de acordo com a metodologia escrita por BIRNBOIN & DOLLY 1979. Resultados: Aeromonas spp foram isoladas em 72,4 por cento e 55,1 por cento das amostras provenientes da entrada e saídsa da lagoa anaeróbia respectivamente , e em 48,3 por cento da saída facultativa variando as contagens entre <3 e 3,0 x 109 NMP/100 mL. Na unidade de desinfecção por cloro entre <3 e 9,0 x 105 NMP/mL Conclusões: Observou-se que embora haja uma tendência de dacaimento nas contagens de Aeromonas, não é possível eliminá-las do sistema estudado, mesmo após cloração. Esses organismos podem representar um risco à saúde devido à seleção de cepas resistentes que são lançadas no meio ambiente.

outbreak of acute gastroenteritis due to Aeromonas sobria in Benghazi, Libyan Arab Jamahiriya

We report an outbreak of acute diarrhoea due to Aeromonas sobria in Benghazi which occurred during a 1-month period in 1997. Of 69 patients admitted with acute gastroenteritis, 28 were positive for A. sobria based on the production of gas from glucose, the production of acetoin, hydrogen sulfide and lysine decarboxylase and on aesculin hydrolysis and fermentation of arabinose and salicin. The strains were sensitive to chloramphenicol, co-trimoxazole, tetracycline and gentamicin but resistant to ampicillin and carbenicillin. We were unable to trace the source of the infection

Aeromonas species isolated from pintado fish (Pseudoplatystoma SP): virulence factors and drug susceptibility

Aeromas has been described as an emergent foodborne pathogen of increasing importance. In this study, we report that 48(per cent) of 50 Pintado fish samples collected at the retail market of São Paulo city were positive for Aeromas sp, as detected by the direct plating method. When the presence/absence method was used, the positivity was 42(per cent). A caviae was the most frequent species, followed by A. hydrophila and A. sobria. Production of cytotoxic enterotoxin, observed in suckling mouse assay, was detected in 67(per cent) of A sobria strains, in 60(per cent) of A. hydrophila strains and in 40(per cent) of A. caviae strains. In vitro tests, performed with HEp-2 cells, showed that 88(per cent) of A. hydrophila, 27(per cent) of A. sobria and 13(per cent) of A. caviae strains were positive for this toxin. The in vivo production of cytotonic enterotoxin, tested after heating the filtrates at 56degreeC for 20 minutes, was detected in 17(per cent) of A. sobria, in 10(per cent) of A. caviae and in none of A. hydrophila strains in vivo. All analyzed strains did not alter HEp-2 cells. 20(per cent) and 16(per cent) of A. sobria and A. caviae isolates, respectively, presented capacity to adhere to HEp-2 cells. In counterpart, invasion of HEp-2 cells was not observed in any isolate. The Aeromonas isolates were sensitive to the majority of the antimicrobiol agents tested.

Prevalência de Aeromonas spp. em fezes diarréicas de crianças menores de 5 anos de idade na cidade de Goiânia, Goiás, no biênio 1995-1996 / The prevalence of Aeromonas spp. in the diarrheal feces of children under the age of 5 years in the city of Goiânia, Goiás in the 1995-1996 biennium

Foram analisadas 163 amostras de fezes de crianças com idade abaixo de 5 anos no período de 1995 a 1996, sendo 91 de fezes diarréicas e 72 de fezes não diarréicas. O material foi coletado em meio para transporte e submetido ao processo de enriquecimento a 4oC por 7 dias. Para o isolamento primário foi utilizado ágar amido ampicilina e incubado a 35oC por 18 a 24 horas. Foram isoladas 20 (21,9%) das seguintes espécies: Aeromonas A. caviae (7,7%), A. salmonicida salmonicida (6,6%), A. sobria (4,3%), A. hydrophila (2,2%) e Salmonicida achromogenes (1,1%). Nenhuma Aeromonas spp foi isolada dos 72 pacientes-controles. A susceptibilidade das amostras de Aeromonas spp aos antimicrobianos foi maior com a ciprofloxacina, diminuindo gradativamente com cloranfenicol, gentamicina, ampicilina e eritromicina.

From 1995 through 1996, 163 fecal specimens of children aged under 5 years were analysed, 91 being from diarrhea feces and 72 without diarrhea. The material was collected in transport medium and submitted to the enrichment procedure at 4 degrees C for 7 days. For the primary isolation starch ampicillin agar was used and incubated at 35 degrees C for 18 to 24 hours. Twenty (20.9%) from the following specimens were isolated: Aeromonas (A.) caviae (7.7%), A. salmonicida salmonicida (6.6%), A. sobria (4.3%), A. hydrophila (2.2%) and Salmonicida achromogenes (1.1%). No Aeromonas spp. was isolated from the 72 control subjects. The Aeromonas spp. susceptibility to antimicrobial was greater with ciprofloxacin, being this susceptibility gradually diminished with chloranphenicol, gentamicin, ampicillin and erythromycin.